淋巴細胞分離液

產(chǎn)品簡介：

人血中紅細胞和白細胞等細胞密度較大，為1.090g/ml左右，淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090g/ml，血小板為1.030~1.035g/ml，本產(chǎn)品為密度在 1.077 g/mL 并且與外周全血等滲的溶液（分離液），經(jīng)過密度梯度離心，使一定密度的細胞按照相應(yīng)密度梯度分布，從各種血細胞中分離出淋巴細胞。

本產(chǎn)品收集細胞的得率大于80%。

使用方法：

常規(guī)實驗操作方法：

1、取新鮮抗凝血2ml，用等體積PBS或Hank’s液混勻。

2、在離心管中加入3ml分離液，小心將稀釋后的血樣平鋪到分離液液面上方。

3、離心 400 g，30-40 min。

4、離心結(jié)束后，此時離心管中由上至下細胞分四層：*一層為血漿層，第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞，第三層為透明分離液層，第四層為紅細胞層。

5、小心吸取第二層細胞到另一離心管中，加入三倍體積的PBS或Hank’s液混勻，60-100g，離心 10min，棄上清。以0.5ml后續(xù)實驗所需相應(yīng)液體重懸目的細胞。

注：血液樣品量增大時，可通過改變離心管直徑的方法始終保持樣本量高度與分離液高度為2、4cm 與3cm，其他分離條件不變。

為滿足客戶實際使用需求，不同血液樣本量推薦具體實驗操作方法詳見說明書。

注意事項：

1、全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得*佳的實驗結(jié)果，*好在取血2h 內(nèi)進行實驗，血液存放時間越長，細胞分離效果越差。血液放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。

2、本實驗*好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面，影響細胞分離效果。

3、吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。

4、吸取過多的淋巴細胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。

5、當血液樣本粘度過高需稀釋時，最優(yōu)稀釋方法：將血液與PBS或 Hank’s液混勻備用。注：不當?shù)南♂尫椒〞档图毎寐始盎钚浴Ｈ缪簶颖窘?jīng)過稀釋則分離過程中需適當降低離心力和離心時間。

7、 因血液樣本的個體差異及血液粘度不同，需調(diào)整離心力及離心時間，離心力最大不超過1000g。

保存條件：

常溫保存，有效期2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。