Cell Freezing Medium

細(xì)胞凍存液（含血清）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細(xì)胞凍存液以進(jìn)口FBS、DMSO為主要原材料配制，適用于是各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞等的凍存保種。

本產(chǎn)品為即用型試劑，儲(chǔ)存穩(wěn)定，使用方便，細(xì)胞存活率高。

使用方法: 

細(xì)胞凍存步驟

1、 常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于試管中。

2、 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細(xì)胞數(shù)。

3、 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，1000rpm離心5分鐘，收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，徹底棄去離心管中的上清液。

4、 加入適量的本凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為1*10⁶-1*10⁷/ml。輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。

5、 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中。

6、 密封標(biāo)記后按常規(guī)操作流程依次經(jīng)4℃，-20℃，-80℃直至液氮罐或用程序降溫儀逐級(jí)降溫凍存。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

1、 從冰箱中取出凍存的細(xì)胞，立即置于37℃水浴槽中快速解凍。

2、 待凍存管中的細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于凍存管中與細(xì)胞混合，將其中的混合液移至含有約5ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中，1000rpm離心5分鐘，收集凍存細(xì)胞沉淀，移去上清液（注意勿將細(xì)胞沉淀倒掉）。

3、 加入適量的新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入細(xì)胞沉淀中，輕柔混勻，將混勻好的細(xì)胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。

4、 鏡檢觀察，待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后可進(jìn)行其他研究或者培養(yǎng)處理。

注意事項(xiàng)：

1、 取用凍存液均要在超凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作 。

2、 初次使用融化后可在2-8℃保存至少1個(gè)月，少量蛋白析出不影響凍存效果。 

3、 凍存時(shí)從室溫可快速降到0℃，再降溫時(shí)一般按每分鐘降溫1～2℃，待降至-80℃以下時(shí)可放入液氮中，在液氮中細(xì)胞可保存數(shù)年或更長(zhǎng)時(shí)間.

4、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件：

-20℃保存，2年有效。