我們的Live或Dead 可固定死細(xì)胞染色試劑盒是用于標(biāo)記細(xì)胞的一組工具，用于細(xì)胞功能的熒光顯微鏡研究。 細(xì)胞的有效標(biāo)記為研究時(shí)空背景下的細(xì)胞事件提供了一種有力的方法。 這種特殊的試劑盒設(shè)計(jì)用于在綠色熒光中均勻標(biāo)記固定的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，以便通過(guò)紫激光激發(fā)在流式細(xì)胞儀中使用。 該試劑盒使用專有的綠色熒光染料，該染料在與細(xì)胞成分結(jié)合后會(huì)發(fā)出更多的熒光。 試劑盒中使用的熒光染料已被紫激光（405 nm激發(fā)）充分激發(fā)到510 nm的熒光。 該試劑盒為所有基本組件提供了優(yōu)化的細(xì)胞標(biāo)記方案。 它是保存特定細(xì)胞熒光圖像的工具，也可用于熒光流式細(xì)胞儀應(yīng)用。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.在HHBS中制備樣品（0.5 mL /測(cè)定）
2.替換為HHBS
3.將Stain It V550添加到細(xì)胞懸液中
4.在室溫或37°C下將細(xì)胞染色20-60分鐘
5.清洗細(xì)胞
6.修復(fù)細(xì)胞（可選）
7.使用適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)/發(fā)射濾光片，用流式細(xì)胞儀和/或熒光顯微鏡檢查樣品

溶液配制

1.儲(chǔ)備溶液配制

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Stain It V550儲(chǔ)備溶液（500X）：
將200 μL DMSO（組分B）添加到Stain It V550（組分A）的小瓶中，得到500X Stain It V550儲(chǔ)備液。

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樣品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的無(wú)疊氮化鈉和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液制備細(xì)胞。

2.用HHBS或您選擇的無(wú)疊氮化物和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液洗滌細(xì)胞一次。

3.以5-10×106 / mL的濃度在HHBS或您選擇的無(wú)疊氮化物和無(wú)血清/蛋白質(zhì)的緩沖液中重懸細(xì)胞。

4.將1 μL 500X Stain It Violet 550儲(chǔ)備溶液添加到0.5 mL細(xì)胞/測(cè)定中，并充分混合。

5.在室溫或37°C，5％CO2的培養(yǎng)箱中避光保存20-60分鐘。 注意：應(yīng)根據(jù)不同細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)確定的染色濃度和孵育時(shí)間。

6.洗滌細(xì)胞兩次，然后用HHBS或您選擇的緩沖液重懸細(xì)胞。

7.根據(jù)需要固定細(xì)胞（可選）。

8.使用適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)/發(fā)射濾光片，使用流式細(xì)胞儀和/或熒光顯微鏡分析細(xì)胞。

參考文獻(xiàn)

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